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程序降溫儀分類和使用步驟介紹

發布日期: 2020-03-26
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   程序控制冷凍裝置俗稱:程序降溫儀,也稱為程序冷凍儀、胚胎冷凍儀、細胞冷凍儀、程控降溫儀;廣泛用于凍存細胞、胚胎等。采用微機控制技術,專用軟件,能較準確地控制液氮的施放量,從而保證被凍存的生物制品以適宜的冷凍速率降溫冷凍。該儀器具有操作簡便、人機界面清楚。
  程序降溫儀是實現生物材料深低溫保存的關鍵設備,根據降溫及控制原理不同,可以將其分為兩類:①液氮噴射式降溫儀。②升降式降溫儀。它們均以液氮為制冷源。程序降溫儀主要由冷卻室、低溫電磁閥、風扇、溫度傳感器、放大電路、微處理機和液氮容器組成。
  液氮噴射式降溫儀適合較大容積樣本的降溫保存,優點在于控溫精確,受外界環境干擾小,但是其價格昂貴,液氮消耗量大,液氮中如有少量水分就會造成輸送管道堵塞和低溫電磁閥失靈。
  升降式降溫儀由液氮容器、步進機、微機控制系統和記錄儀組成。它是利用液氮的自然蒸發在杜瓦瓶頸部所形成的溫場(0~-196℃),由步進機根據預先設定的降溫、復溫程序控制生物標本在此溫度區內上下移動的速率,來控制標本的溫度和降溫速率。
  程序降溫儀步驟:
  (1)冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
  (2)配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
  (3)離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
  (4)取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSOzui后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ml,混合均勻,分裝于已標示完全之冷凍保存管中,1~2ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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